專利名稱：截短側耳素絡合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及截短側耳素衍生物。具體說，本發(fā)明提供了截短側耳素衍生物和環(huán)糊精的絡合物以及含有這種絡合物的藥物制劑。
截短側耳素衍生物是對一系列病原微生物具有優(yōu)良微生物學活性的抗生素。特別是式Ⅰ的截短側耳素衍生物
即14-O-〔1-((D)-2-氨基-3-甲基丁酰基氨基)-2-甲基丙-2-基硫代乙?；硞榷?mutilin)，在游離堿形式下或者在酸加成鹽或季(胺)鹽形式下，對于許多革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌是高度有效的。由于存在這些性質，可以使用上述化合物作為治療因這些病原體誘發(fā)的疾病的抗生素，其中大部分作為獸用藥，例如用于家禽、豬、家畜、綿羊和山羊的疾病治療，特別是呼吸道疾病和痢疾的治療。
環(huán)糊精是由α(1→4)-連接的D-吡喃(型)葡萄糖單元組成的環(huán)狀低聚糖類，例如對α-、β-、和γ-環(huán)糊精來說，分別由6、7和8個單元組成，在文獻中，例如在J.Szejtli著的＜環(huán)糊精技術＞(Kluwer Academic出版社，1988年)和D.Duchene著的＜環(huán)糊精及其工業(yè)應用＞(Sante′版，1987年)之中，對之作了詳細介紹。在本發(fā)明制劑中，可以使用任何環(huán)糊精，例如α-、β-和γ-環(huán)糊精或其衍生物。優(yōu)選使用β-或γ-環(huán)糊精或其衍生物，尤其是β-或γ-環(huán)糊精。α-、β-和γ-環(huán)糊精是無毒的化合物，它們可以作為口服制劑的藥物賦形劑使用而無危險。此外，在許多國家還允許把β-環(huán)糊精作為人用食品添加劑使用。
環(huán)糊精的衍生物，例如是含低級醇的醚類，像甲基環(huán)糊精或羥丙基環(huán)糊精等。
人們從文獻中獲知，環(huán)糊精與適當的客體分子能夠形成包合物(包合絡合物)，但是難于預期用形成的絡合物所得到的效果。根據本發(fā)明制劑的性質可以得出，其中同樣存在包合絡合物;因為僅僅從純粹的物理狀態(tài)混合物不能獲得所觀察到的那些所需的性能。
出乎意料地觀察到的現象是式Ⅰ化合物在游離堿形式下或者在季胺形式下與環(huán)糊精形成絡合物時，所得到的藥物制劑的性能，特別是飼料混合物的貯存穩(wěn)定性得到顯著改善。
從例如Sandoz的美國專利USP4675330實施例12中可知，式Ⅰ化合物是已知物質。
治療或預防動物疾病時，抗生素的優(yōu)選給藥方式是在飲水或飼料中投藥。雖然水溶性鹽酸鹽形式下的式Ⅰ化合物可以方便而有效地通過飲水給藥，但是卻難于借助于飼料給藥，因為該物質被傳統(tǒng)的全飼料混合物中所含成分所極快地分解。然而，對于實際使用來說，備用的飼料-藥物混合物的穩(wěn)定性是必不可少的一個條件，因為生產出這種混合物原料之后必須有可能將其貯存至少幾個月。
因此，人們需要這樣一種制劑，它在備用飼料混合物中有適度的穩(wěn)定性而且能夠經口給動物投藥。對于飼料來說，除了所說的穩(wěn)定性要求之外，其它基本的使用要求是良好的吸收性，生產成本低，生產過程簡單和被處置動物的接受性等。
現在發(fā)現，包含以游離堿、酸加成鹽或季胺鹽形式的式Ⅰ化合物和環(huán)糊精所形成的絡合物的制劑，在很大程度上滿足這些要求。
因此，本發(fā)明涉及如上所述的以游離堿、酸加成鹽或季胺鹽形式的式Ⅰ的截短側耳素衍生物和環(huán)糊精的絡合物，以下簡記作“本發(fā)明的絡合物”。
本發(fā)明還涉及含有如上所述的以游離堿、藥物適用的酸加成鹽或季胺鹽形式的式Ⅰ截短側耳素衍生物和環(huán)糊精的絡合物，同時還含有至少一種藥物適用的載體或稀釋劑的藥物制劑，以下簡記作“本發(fā)明的制劑”。
本發(fā)明的絡合物可以用這樣一種方法制備，其中包括將以游離堿、酸加成鹽或季胺鹽形式的式Ⅰ化合物和一種適當的環(huán)糊精進行絡合。
本發(fā)明的方法按傳統(tǒng)方式實施，優(yōu)選在適于形成絡合物的條件下與一種適當的環(huán)糊精接觸。各種傳統(tǒng)的方法修改方案均可以采用。可以簡單地使所說化合物和環(huán)糊精的水溶液變干，為此可以采用冷凍干燥法、噴霧干燥法和/或蒸發(fā)法。所說的絡合物還可以利用水使物理狀態(tài)混合物變濕后充分捏和的方法制得，此外也可以在例如球磨機中研制這雙組份物理混合物的方法制備。另外，通過溶液或溶劑混合物結晶的方法可以獲得所說的絡合物。
式Ⅰ化合物與環(huán)糊精之比，可以在大范圍內變化;此二成分間的摩爾比，例如可以大約1∶0.25至大約1∶2，優(yōu)選大約1∶0.75至大約1∶1.25，尤其是大約1∶1。
據證明，例如用1H-NHR譜法(見下述實驗3)證明，在式Ⅰ化合物和環(huán)糊精分子之間形成一種化學鍵，這種鍵至少包含氫結合或范德華力。
本發(fā)明的制劑按傳統(tǒng)方式制造，例如用一種包括混合由上述定義的以游離堿、藥物適用的酸加成鹽或季胺鹽形式的式Ⅰ截短側耳素衍生物和適當的環(huán)糊精形成的絡合物和至少一種藥物適用的載體或稀釋劑的方法制造。
本發(fā)明的制劑可以用以游離堿形或水溶性或水不溶性鹽形式的式Ⅰ化合物制造，優(yōu)選鹽酸鹽。
所形成的包合絡合物在下列實驗中得到更詳細的說明1.相-溶解度圖根據此相-溶解度圖(參見D.Duchene著《環(huán)糊精及其工業(yè)應用》，Sante′版，1987年中，“包合物的研究和制造方法及其應用”一文)，得到了下列兩種類型的包合物化合物Ⅰ(堿形)-β-環(huán)糊精AL型化合物Ⅰ(堿形)-γ-環(huán)糊精BS型。
對于式Ⅰ化合物來說，與β-和γ-環(huán)糊精的絡合常數分別為1050 M-1和1400 M-1。
2.量熱法在用微量熱法測量式Ⅰ化合物的鹽酸鹽和β-環(huán)糊精的絡合物時(參見《熱化學學報》，109，139-143頁，1986年中刊載的L.E.Briggner等人，“用金剛烷-1-羧酸鹽微量熱滴定β-環(huán)糊精”一文)，測得的絡合常數為1004M-1。
3.1H-NMR譜法在用鹽酸鹽形的式Ⅰ化合物和β-環(huán)糊精在D2O中的溶液得到的1H-NMR譜上，與式Ⅰ化合物純溶液的1H-NMR譜相比，在信號位置上出現了明顯的變化，這些變化因下列官能團所致質子號 式I化合物 β-環(huán)糊精與式I化(鹽酸鹽) 合物的絡合物(ppm) (實施例3,ppm)16 d0.73 s寬帶 0.6917 d0.97 s寬帶 0.9618 s1.45 s 1.498e d1.99 d 1.724 s2.56 s寬帶 2.5820.20 dd5.24 dd寬帶 5.3519 dd 6.37 s寬帶 ～6.54.差示掃描量熱法一種相當于實施例1的由γ-環(huán)糊精和鹽酸鹽形的式Ⅰ化合物組成的制劑，其差示掃描量熱曲熱在193℃有一個吸熱信號(10°K/min)。
5.絡合物分析相當于實施例1的制劑中含量的測定結果式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)28.6%，H2O 5.9%。此含量相當于式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)與環(huán)糊精之摩爾比為1∶1。
在下列非限制性的實施例中，溫度均指攝氏度值。
實施例1加熱下將5.76克γ-環(huán)糊精溶解在18ml水中，加入2.5克式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)。攪拌下將溶液冷卻到5℃。傾瀉形成的白色晶形沉淀，在真空干燥室中干燥。
實施例2加熱下將7.8克β-環(huán)糊精溶于60ml水中，加入3.87克式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)。將溶液減壓蒸干，干燥殘渣粉碎后過1mm篩。
實施例3按與實施例2相似的方式操作，但是溶液在180℃空氣溫度下噴霧干燥。
實施例4按與實施例2相似的方式操作，但是溶液被冷凍到-40℃3小時冷凍干燥之。
實施例5加熱下將2.9克γ-環(huán)糊精溶于10ml水中，加入2.5克式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)。溶液在180℃空氣溫度下噴霧干燥。
實施例6混合7.7克式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)和15.5克β-環(huán)糊精，在捏和機中加入15ml水。將此濕物質充分捏和3小時，然后在真空干燥室干燥，粉碎過篩。
實施例7混合3.5克式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)和14.1克β-環(huán)糊精，在球磨機中研磨6小時。
實施例8預混合物將相當于實施例1-7的制劑與粉狀飼料混合物混合成2%的預混合物，在球磨機中用外加的粉狀飼料混合物將此預混合物稀釋到式Ⅰ化合物濃度為200ppm。
實施例9粒狀飼料利用適當的制粒機和水蒸汽將實施例8的飼料混合物壓成粒狀飼料。
下列試驗中說明本發(fā)明制劑的一些用戶所需的性質1.飼料穩(wěn)定性作為典型飼料，使用具有下列組成的備用飼料喂養(yǎng)小豬燕麥 10.0%玉米 29.0%大麥 26.7%小麥 8.0%大豆糠 23.0%碳酸鈣 1.05%碳酸氫二鈣 1.5%碘化的家畜鹽 0.25%預混合物(礦物質-維生素) 0.5%
將各種形式的制劑與含200ppm式Ⅰ化合物的備用飼料混合，30℃下貯存幾周;用高壓液相色譜(HPLC)分析新鮮混合物的初含量和貯存2、4和8周之后的含量值。
表1說明，在飼料混合物中使用本發(fā)明的絡合物時，與不含環(huán)糊精的相應制劑相比，貯存穩(wěn)定性得到改善。
表1飼料混合物 含量(%)含 初始值 2周后 4周后 8周后僅式I的化合物 100 15 8 6(鹽酸鹽)實施例3的絡合物 100 89 87 90實施例6的絡合物 100 91 92 88為了確定式Ⅰ化合物與環(huán)糊精間的最佳比例，研究了各種濃度的環(huán)糊精。有關飼料混合物貯存穩(wěn)定性的試驗結果匯于表2(第一列中的“比例”指式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)與β-環(huán)糊精之比)。
表2含量(%)比例 初始值 一月后 二月后 三月后1:0 100 9 9 71:2 100 86 89 911:1 100 90 89 961:0.75 100 49 45 381:0.5 100 18 9 81:0.25 100 14 8 9
2.口吸收試驗了給鼠和豬投藥25mg/kg體重實施例3的制劑后的吸收情況，并且與飲水中含純的式Ⅰ化合物(鹽酸鹽)的對照作了比較。24小時后取血樣，用微生物分析法測量了血漿中活性物質濃度。表3的結果說明，以本發(fā)明的絡合物形式給藥時式Ⅰ化合物的吸收作用。
表3Cmax(μg/ml) AUC(μg/ml.時)鼠 豬 鼠 豬僅式I化合物 8.6 1.2 139 21.4(鹽酸鹽)實施例3的絡合物 11.7 1.6 294 24.3注Cmax＝最大血漿濃度AUC＝曲線下的面積。
因此證明上述的以游離堿、藥物適用的酸加成鹽或季胺鹽形式的式Ⅰ截短側耳素衍生物的絡合物，作為藥物使用，尤其是作為抗生素使用來治療革蘭氏陽性和革蘭氏陰性菌誘發(fā)的疾病，例如呼吸道疾病和痢疾。
對于此用途而言，所用的劑量當然會隨所用的具體絡合物、投藥方式、治療的病體和所需的治療而變。但是，所說絡合物的日投藥劑量，例如對豬而言的投藥量為大約1mg/kg至大約100mg/kg體重時，通常從大約5mg/kg至大約10mg/kg體重時，必要時每天以2～4分劑給藥時，一般獲得滿意的結果。
本發(fā)明的絡合物可以按與用于這些病癥的已知物質相似的方式給藥;可以與傳統(tǒng)的藥物適用的載體和稀釋劑，以及與其它選擇性賦形劑混合，并且可以以粒狀飼料和預混合物等形式經口給藥。
權利要求
1.一種以游離堿、酸加成鹽或季胺型的式Ⅰ的截短側耳素衍生物
和環(huán)糊精的絡合物。
2.一種藥物制劑，其中含有由權利要求1定義的以游離堿、藥物適用的酸加成鹽或季胺鹽型的式Ⅰ的截短側耳素衍生物和環(huán)糊精形成的絡合物以及至少一種藥物適用的載體或稀釋劑。
3.根據權利要求1的絡合物或權利要求2的藥物制劑，其中所說的式Ⅰ截短側耳素衍生物呈鹽酸鹽型。
4.根據權利要求1的絡合物或權利要求2的藥物制劑，其中所說的環(huán)糊精是β-或γ-環(huán)糊精。
5.根據權利要求1的絡合物或權利要求2的藥物制劑，其中所說截短側耳素衍生物與環(huán)糊精之摩爾比為1∶0.25～1∶2。
6.根據權利要求1的絡合物或權利要求2的藥物制劑，其中截短側耳素衍生物與環(huán)糊精的摩爾比為1∶0.75～1∶1.25。
7.根據權利要求1的絡合物或權利要求2的藥物制劑，其中截短側耳素衍生物與環(huán)糊精之摩爾比為1∶1。
8.一種制備權利要求1的絡合物的方法，其中包括使權利要求1定義的以游離堿、酸加成鹽或季胺鹽型的式Ⅰ化合物與一種適當的環(huán)糊精進行絡合。
9.一種制造權利要求2的藥物制劑的方法，其中包括使權利要求1定義的以游離堿、藥物適用的酸加成鹽或季胺鹽型的式Ⅰ截短側耳素衍生物和一種適當的環(huán)糊精形成的絡合物，與至少一種藥物適用的載體或稀釋劑混合。
全文摘要
介紹了由以游離堿、酸加成鹽或季胺鹽型的式I的截短側耳素衍生物和環(huán)糊精形成的一些絡合物和含此絡合物的藥物制劑。該絡合物可以用絡合上述截短側耳素和一種適當的環(huán)糊精的方法制備，據證明可以作為藥物(如抗生素)，尤其是作為獸藥使用，如以飼料添加劑形式使用。
文檔編號A61K31/215GK1088914SQ9310010
公開日1994年7月6日 申請日期1993年1月1日 優(yōu)先權日1993年1月1日
發(fā)明者H·F·馬圖斯, E·蔡斯爾 申請人:生化企業(yè)