專利名稱：茶色素在制備降低內(nèi)皮素的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及茶色素的藥物新用途，具體涉及茶色素在制備降低內(nèi)皮素的藥物中的應(yīng)用，屬于中藥領(lǐng)域。
茶色素是從茶葉中提取的植物天然色素，是茶多酚中兒茶素經(jīng)過氧化而成的一種活性色素復(fù)合物。茶色素由茶黃素、茶紅素和茶褐素組成。對(duì)于茶色素的研究已有文獻(xiàn)報(bào)道。CN1074618A公開了茶色素及其生產(chǎn)方法。該生產(chǎn)過程為，茶葉以煎煮取汁，堿化，濃縮，酸化，加入乙醇回流，乙醇回流液再堿化得到茶色素結(jié)晶品，經(jīng)真空干燥，即得到該茶色素。用該方法制得的茶色素中茶黃素、茶紅素和茶褐素三者有恒定的比例，可作為藥用。對(duì)于茶色素的藥用價(jià)值報(bào)道可以概括為降低血液粘滯度、降血脂、降膽固醇、預(yù)防和治療心血管疾病。但到目前為止，尚未見有關(guān)茶色素用于降低內(nèi)皮素的報(bào)道。
本發(fā)明的目的是提供茶色素的一種新的制藥用途，即茶色素在制備降低內(nèi)皮素的藥物中的應(yīng)用。
近年來，血清內(nèi)皮素(ET)在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中的作用受到人們的廣泛重視。已證實(shí)內(nèi)皮素有強(qiáng)烈的收端血管作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示內(nèi)皮素抗血清可使心肌梗死面積縮小。并且文獻(xiàn)報(bào)道高血壓冠心病患者血清內(nèi)皮素升高，因此，尋找一種能夠降低血清內(nèi)皮素的藥物，將有利于心血管疾病的治療。茶色素具有明顯降低血清內(nèi)皮素的作用。
本發(fā)明茶色素的提取方法可以按照已知的提取工藝進(jìn)行提取，優(yōu)選是按照下述方法提取的茶色素(1)、將茶葉按1∶15-30倍比例加水后，經(jīng)一次或一次以上的煎煮取汁，煎出液用在水溶液中能產(chǎn)生OH-離子的化合物進(jìn)行堿化，調(diào)節(jié)PH8-10，然后在小于70℃下加熱濃縮該堿化液至原體積量的1/4-1/10，得濃縮液；(2)濃縮液用酸調(diào)至PH3-6，酸化液加入乙醇1-10體積倍量，回流0,5-2小時(shí)，得醇回流液；(3)醇回流液用在水溶液能產(chǎn)生OH-離子的化合物調(diào)節(jié)PH7-10，沉淀后過濾，得茶色素結(jié)晶，茶色素結(jié)晶真空干燥，即得茶色素產(chǎn)品。
本發(fā)明的茶色素是一種藥物活性成分，按照常規(guī)的制劑工藝，可以以茶色素為主活性組份，加入常規(guī)的賦性劑、調(diào)味劑、崩解劑、防腐劑、潤(rùn)滑劑、濕潤(rùn)劑、、粘合劑、溶劑、增稠劑、增溶劑等藥物輔料，制成任何一種適合于臨床上使用的劑型，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液體制劑、注射劑等。
由于本發(fā)明首次公開了茶色素降低血清內(nèi)皮素的藥用作用，因此，將茶色素單獨(dú)或與其他活性組份或輔料配合制成藥劑，只要是該藥劑用于降低內(nèi)皮素，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
本發(fā)明的茶色素在制成任何一種劑型時(shí)，均具有降低內(nèi)皮素的作用。任何藥劑，如果其組份中含有茶色素或僅以茶色素單一成分制備成藥，在其包裝或說明書等標(biāo)識(shí)上或者在其他任何宣傳品上只要注明或提示具有降低內(nèi)皮素的作用，則落入本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
本發(fā)明的茶色素是來源于藥食兩用的天然植物茶葉。因此，也可以將茶色素制成保健食品或保健藥品。將茶色素制成的保健食品或保健藥品，如果在其包裝或說明書等標(biāo)識(shí)上注明或提示有降低內(nèi)皮素的作用，也落入本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
實(shí)施例1配方茶色素125克藥用淀粉 875克將上述組份入攪拌機(jī)，充分?jǐn)嚢杌靹?，用膠囊機(jī)裝膠囊，每粒裝填1克，制得茶色素膠囊1000粒，每粒膠囊含茶色素125毫克。
實(shí)施例2茶色素 250克蒸餾水 2000毫升甜菊甙 1克將茶色素溶于蒸餾水中，充分混勻，加入甜菊甙，再次攪拌混勻，用罐裝機(jī)裝入玻璃瓶中，每瓶裝10毫升，滅菌，制得茶色素口服液。
實(shí)驗(yàn)例1 茶色素對(duì)內(nèi)皮素及鈣相關(guān)激素的影響近年來，ET在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中的作用受到人們的廣泛重視，已證實(shí)ET有強(qiáng)烈的收縮血管作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示ET抗血清可使心肌梗死面積縮小。
鈣離子含量及代謝對(duì)于心血管系統(tǒng)有著重要的意義，有關(guān)鈣相關(guān)激素在心血管系統(tǒng)的改變尚未見報(bào)道。
茶色素是從綠茶中提取的植物天然色素，經(jīng)一系列藥理，毒理研究及臨床應(yīng)用，證實(shí)其為一種防治心腦血管病的較為理想的新藥。
本文應(yīng)用茶色素治療高血壓，冠心病患者，觀察其對(duì)內(nèi)皮素及鈣相關(guān)激素的影響，對(duì)其治療機(jī)制進(jìn)行探討，有關(guān)這方面的研究尚未見報(bào)道。
資料與方法1、對(duì)象觀察組32入，其中冠心病21人，高血壓病11人，其中男性20人，女性12人，年齡45.6±5.8；對(duì)照組36人，均為身體健康查體人員，男性20人，女性16人，年齡41.6±4.8。
2、方法觀察組口服茶色素膠囊每日3粒×4周，全部病人于治療前后抽取靜脈血測(cè)定并記錄其內(nèi)皮素及BGP、HCT、CGRP，采用放射免疫分析法。
3、數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，顯著性檢驗(yàn)采用配對(duì)計(jì)量資料比較的T檢驗(yàn)及兩樣本均數(shù)比較的T檢驗(yàn)，以P＜0.05為顯著性差異值。
結(jié)果一、對(duì)照組與觀察組各指標(biāo)比較見表1，從中可見除HCT外觀察組各指標(biāo)均高于對(duì)照組p＜0.001。
表1觀察組與對(duì)照組各指標(biāo)比較表例數(shù) ET BGPhGT CGRP對(duì)照組 36 60.7±15.9 1.69±0.8 82.4±17.684.48±18.4觀察組 32 180.09±50.04Δ18.8±17.3Δ 86.4±45.5241.67±90.7Δ＝P＜0.001二、觀察組服藥前后各指標(biāo)比較見表2，可見服藥后各指標(biāo)均較前下降表2觀察組服藥前后各指標(biāo)比較表ET BGP hCTCGRP治療前 180.09±50.6418.8±17.3 86.4±45.5 241.67±90.7治療后 96.6±30.54Δ 7.49±3.8Δ 41.77±14.5105±30.13ΔΔ＝P＜0.001討論一、觀察組ET的變化本文結(jié)果顯示高血壓冠心病患者ET升高，與文獻(xiàn)報(bào)道相似。其機(jī)制為(1)動(dòng)脈粥樣硬化及自發(fā)痙攣使血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，受損的血管內(nèi)皮細(xì)胞使ET的合成及釋放發(fā)生異常，導(dǎo)致血管尤其是冠脈持續(xù)收縮，血管痙攣后內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)一步受損，形成惡性循環(huán)。ET是血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的21肽血管收縮物質(zhì)，對(duì)于血管的收縮效應(yīng)，ET可能由兩種細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)系統(tǒng)所介導(dǎo)，即鈣通道開放和磷酯醇活化，ET刺激磷脂酶活化后，促進(jìn)三磷酸肌醇生成，后者促進(jìn)鈣從鈣儲(chǔ)備中釋放至胞漿；活化的ET受體亦刺激電壓依賴性鈣通道和受體操作性鈣通道，促進(jìn)細(xì)胞外鈣內(nèi)流，增高細(xì)胞內(nèi)游離鈣導(dǎo)致血管收縮。ET激活磷脂酶A2后產(chǎn)生的TXA2等物質(zhì)可進(jìn)一步加強(qiáng)血管收縮效應(yīng)。ET對(duì)體內(nèi)不同血管的收縮強(qiáng)度不同，對(duì)冠脈最強(qiáng)，次為肢體動(dòng)脈。
對(duì)于心肌，Kramer認(rèn)為ET可能是哺乳類動(dòng)物心臟最強(qiáng)的正性肌力物質(zhì)，目前傾向于認(rèn)為正性肌力的作用通過下述機(jī)制實(shí)現(xiàn)。(1)提高肌纖維對(duì)鈣的敏感性，(2)促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)堿化造成鈉增加，進(jìn)而激活鈉、鈣交換，導(dǎo)致鈣增加和心肌收縮力增強(qiáng)，(3)促進(jìn)心肌細(xì)胞肥大。但過高的ET可能增加血管阻力，并使心肌細(xì)胞內(nèi)鈣超負(fù)荷，從而損傷心肌細(xì)胞，誘發(fā)或加重心力衰竭。
Salvati等報(bào)告，ET可引起室速及室顫，其致心律失常作用不是繼發(fā)于心肌缺血，而是對(duì)心肌的直接作用?？傊珽T對(duì)于心血管系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展有極重要的作用。
二、本組測(cè)定的結(jié)果表示，服用茶色素后，ET的含量明顯下降，茶色素使內(nèi)皮細(xì)胞分泌，ET減少的機(jī)理可能是(1)茶色素能使缺血心肌氧自由基的生成減少，提高SOD的含量，從而減輕對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷，(2)內(nèi)皮細(xì)胞功能改替后，合成和釋放內(nèi)皮活性舒張因子(EDRF)增加，后者是ET的生理拮抗劑，可使ET合成減少。
本研究發(fā)現(xiàn)高血壓、冠心病病人，三種鈣相關(guān)激素含量均高于正常，提示存在鈣代謝異常。高血壓、冠心病病人ET含量明顯高于正常，人體內(nèi)降鈣素基因相關(guān)肽含量代償性增高，以抑制ET的mRNA表達(dá)，相應(yīng)引起降鈣素及骨鈣素的增高。茶色素可通過多種機(jī)制降低ET含量，故也可相應(yīng)降低降鈣素基因相關(guān)肽及相應(yīng)激素含量，其機(jī)制有待進(jìn)一步探討。
結(jié)論(1)心血管系統(tǒng)疾病患者ET含量明顯升高，與文獻(xiàn)報(bào)道大致相同。
(2)觀察組鈣相關(guān)激素含量明顯升高，其機(jī)制有待進(jìn)一步探討。
(3)茶色素可使ET及鈣相關(guān)激素降低，保護(hù)內(nèi)皮組織，使其損傷減輕，功能恢復(fù)，從而證實(shí)茶色素明顯有益于心血管疾病的恢復(fù)，值得臨床推廣應(yīng)用。
實(shí)驗(yàn)例2 茶色素抗高血脂降低內(nèi)皮素增強(qiáng)腫瘤免疫功能改善血流變的臨床觀察我們對(duì)茶色素的臨床觀察，發(fā)現(xiàn)茶色素對(duì)降低TC、TG、LDL-C、Apo-B、內(nèi)皮素和增高HDL-C、Apo-A、HDL3-ch，改善血流變，調(diào)節(jié)微量元素，增強(qiáng)免疫功能，收到滿意效果。
1對(duì)象方法
1.1病例選擇 血脂異常者，指TC、TG、LDL-C、Apo-B四項(xiàng)中單項(xiàng)或多項(xiàng)升高者，或HDL-C、Apo-A降低者，共214例；對(duì)132例Apo-A、Apo-B的觀察，對(duì)63例糖尿病HDL-ch亞組HDL2-ch、HDL3-ch、HDL2-ch/HDL3-ch觀察，對(duì)76例心肌缺血心梗內(nèi)皮素的觀察，對(duì)30例腫瘤血Zn、Se及T細(xì)胞亞群觀察，對(duì)98例冠心病或高脂血癥血流變的觀察，年齡45～84歲，性別男390人，女161人。
血脂正常值TC＜5.70MMol/L，TG＜1.60mmol/L，LDL＜3.1mmol/L，HDL男＞1.04，女＞1.17mmol/L。
1.2給藥方法全部觀察病歷停用其它調(diào)脂劑，服用中外合資江西綠色制藥有限公司提供的茶色素膠囊每次250mg(2粒)，每目3次，療程30天。服藥前后取血測(cè)所觀察項(xiàng)目。受檢者采血前一天晚餐不能進(jìn)高脂飲食飲酒，晨起空腹取靜脈血。采用自身對(duì)照方法。檢測(cè)結(jié)果作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
1.3療效判定(1)顯效達(dá)以下任何一項(xiàng)者，TC下降至正常或≥20％，TG下降至正?；颉?0％，LDL-C下降至正?；颉?0％，HDL-C上升至正常濟(jì)頡菀.257mmol/L。(2)有效TC下降10％～20％，TG下降20％～40％，LDL下降10％～20％，HDL上升0.103～0.25mmol/L。(3)無效未達(dá)到有效標(biāo)準(zhǔn)者。(4)惡化達(dá)以下任何一項(xiàng)，TC上升≥10％，TG上升≥10％，HDL下降0.103～0.157mmol/L，LDL上升≥10％。
2結(jié)果2.1 214例高脂患者用茶色素治療后TC、TG、HDL-C、LDL-C的療效分析(表1)表1 茶色素治療214例血脂異常的有效率(％)例數(shù)顯效(n) 有效(n)無效(n) 惡化(n)總有效率(n)TC 11535.65(41) 31.30(36)29.56(34)3.47(4)66.95(77)TG 16535.15(58) 32.72(54)28.48(47)3.63(6)67.87(112)HDL 93 38.7(36)38.7(36) 18.27(17)4.3(4) 77.41(72)LDL 12845.31(58) 15.62(20)33.59(43)5.46(7)60.93(78)2.2 132例高脂血癥患者服茶色素的結(jié)果(表2)表2用茶色素前后血脂及載脂蛋白的水平變化(X±s，mmol/L)組別 例數(shù) TC TG LDL-C HDL-CApo-AApo-B服藥前 132 5.97±0.251.82±0.18 3.78±0.161.26±0.270.47±0.19 0.81±0.16服藥后 132 5.89±0.23** 1.77±0.16* 3.72±0.19** 1.34±0.12** 0.59±0.17*** 0.69±0.1***注*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.012.3 63例服用茶色素前后血清HDL-ch亞組的水平比較(表3)表3用茶色素前后血清HDL-ch亞組的水平比較(X±s(mg/dl)，n＝63)組別 HDL-chHDL2-ch HDL3-ch HDL2-ch/HDL3-ch用藥前 47.91±9.45 17.10±7.03 30.81±6.14 0.56±1.14用藥后 51.90±4.78 25.00±6.31 26.90±7.02 0.93±0.90P值 ＞0.05＜0.001 ＜0.01 ＜0.012.4 34例服用茶色素對(duì)血液流變學(xué)的影響(表4)表4用茶色素前后血流流變學(xué)的比較(X±s)服藥前(n＝34)服藥后(n＝34)全血比粘度高切 7.112±1.488 5.458±0.347*低切 13.151±3.247 7.357±1.234全血還原粘度高切 12.875±1.925 10.486±1.042*低切 23.97±4.148 14.852±2.081血漿比粘度 1.96±0.157 1.745±0.086血沉mm/h 21.232±14.87622.684±12.374紅細(xì)胞壓積％ 48.585±6.754 41.924±4.107*纖維蛋白原g/l 4.86±1.313.55±0.73*t檢驗(yàn)*P＜0.0564例服用茶色素對(duì)血流變的影響(表5)
表5用茶色素治療前后血流變學(xué)的變化X±s(mmol/L)項(xiàng)目 變化率(％) t值 P值給藥前 給藥后全血粘度高切率 5.22±1.42 4.73±1.169.38 2.14＜0.05全血粘度低切率 6.89±2.48 6.15±1.5410.74 2.03＜0.05血漿粘度 1.82±0.18 1.72±0.165.49 3.32＜0.01纖維蛋白原(g/l) 3.92±1.11 3.20±1.0218.36 3.82＜0.012.5 30例瘤病人服用茶色素后血鋅、硒、T細(xì)胞亞群的變化(表6)表6服用茶色素前后腫瘤病人鋅、硒與T細(xì)胞亞群變化的比較(X±s)T細(xì)胞亞群(％) 微量元素(mg/ml)血漿中 細(xì)胞內(nèi)CD3CD4CD3CD4/CD3鋅 硒 鋅 硒服藥前 51.00±1.57 35.75±1.93 26.98±1.23 1.33±0.10 0.91±0.28 0.0021±0.0019 8.21±2.47 0.021±0.001服藥后 51.00±1.58 35.85±1.90 26.92±1.22 1.36±0.11 0.91±0.27 0.0022±0.0027 8.21±2.46 0.031±0.001P值 - ＜0.05＜0.05＜0.05 ＜0.05 -＜0.052.6 76例服用茶色素前后血清內(nèi)皮素的觀察(表7)表7 4組服茶色素前后血清內(nèi)皮素濃度的測(cè)定例數(shù) 治療前 治療后 變化率(％)正常對(duì)照 30 26.20±3.4 20.38±2.7522.21老年無癥狀心肌缺血組 14 38.32±4.1332.60±3.9 16.02老年心絞痛組 20 67.61±9.0254.31±5.8 19.67老年心肌梗組 12 115.75±15.45 98.75±12.04 14.683討論茶色素是從天然的綠茶中提取的一種以兒茶素為主的多元酚類特質(zhì)，經(jīng)過化學(xué)結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變而成為一類水溶性色素。通過我們臨床觀察，證實(shí)茶色素有降低膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、載脂蛋白B(Apo-B)，升高高密度脂蛋白(HDL-C)，載脂蛋白A(Apo-A)的作用。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理都有顯著性，結(jié)果非常滿意。HDL-C具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，所以在降脂藥的研究中，重要的是找出既能降低LDL-C和TG，同時(shí)又能升高HDL-C，并且升高其亞組HDL2-ch，降低HDL3-ch，使其比例增加。臨床觀察證實(shí)，茶色素符合這一要求。多年來許多調(diào)脂藥問世，臨床實(shí)踐不能令人滿意，如膽酸贅合物、苯氧芳酸類有調(diào)血脂作用，但副作用也較明顯；潘特生副作用小但調(diào)脂作用也差；有些降脂藥長(zhǎng)期服用具有對(duì)肝腎損害的毒副作用。而茶色素通過臨床觀察沒有發(fā)現(xiàn)任何副作用，是值得推廣使用的藥物。它具有延緩動(dòng)脈粥樣硬化，減少冠心病發(fā)病率的作用。對(duì)在我國占死亡第一位的心腦血管的預(yù)防，具有劃時(shí)代的意義。
內(nèi)皮素是一種多肽物質(zhì)，以旁分泌和自分泌式調(diào)節(jié)局部血管緊張度，參與調(diào)節(jié)血壓、促進(jìn)血管平滑肌的增殖，調(diào)節(jié)心肌代謝和內(nèi)分泌功能。生理狀態(tài)下釋放量很低，在心肌缺血，心肌梗塞等心肌缺氧狀態(tài)下釋放增加。據(jù)報(bào)道冠狀脈內(nèi)血栓形成與內(nèi)皮素水平增高有關(guān)，我們對(duì)76例服用茶色素的臨術(shù)觀察發(fā)現(xiàn)，老年無癥狀心肌缺血組、老年心絞痛組、老年心肌梗塞組內(nèi)皮素均有明顯下降，特別是后兩組均有顯著性差異(P＜0.001)。
對(duì)98例血液流變學(xué)的觀察，服茶色素前后對(duì)全血粘度高切率、全血粘度低切率、血漿粘度比、纖維蛋白原，均有明顯降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(P＜0.05)。茶色素能有效的降低血液粘度，主要是通過降低纖維蛋白源，改善細(xì)胞膜的功能及血小板的流變性，改善血脂代謝，降低血脂有關(guān)。
對(duì)30例腫瘤病人觀察，腫瘤患者由于多種因素使T細(xì)胞功能降低，免疫功能衰退，另外腫瘤患者對(duì)于組織壞死反應(yīng)的白細(xì)胞內(nèi)慢性調(diào)節(jié)物可使鋅排泄增加，因而使患者缺鋅。某些作者認(rèn)為，硒的缺乏可能是癌的發(fā)病原因。硒可能通過選擇性影響細(xì)胞糖酵解，抑制癌細(xì)胞的供能過程。它能促進(jìn)和激活免疫反應(yīng)。T細(xì)胞亞群是反應(yīng)細(xì)胞免疫的，經(jīng)服用茶色素后，與服前對(duì)比發(fā)現(xiàn)，抑制T細(xì)胞CD有上升趨勢(shì)，高于對(duì)照組P＜0.01。服茶色素后血硒與T細(xì)胞CD8指標(biāo)比服藥前均有增高，這表明茶色素通過增加體內(nèi)微量元素硒的含量而調(diào)節(jié)免疫功能，抑制了腫瘤的發(fā)展。
權(quán)利要求
1.茶色素在制備降低內(nèi)皮素的藥物中的應(yīng)用。
2.茶色素在制備降低鈣相關(guān)激素的藥物中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的應(yīng)用，其中所說的鈣相關(guān)激素包括骨鈣素(BGP)、降鈣素(HCT)及降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)。
全文摘要
本發(fā)明公開了茶色素的新制藥用途,即茶色素具有降低血清內(nèi)皮素及鈣相關(guān)激素的作用。
文檔編號(hào)A61P5/00GK1208623SQ97115209
公開日1999年2月24日 申請(qǐng)日期1997年8月18日 優(yōu)先權(quán)日1997年8月18日
發(fā)明者孫劉根, 田曉莉, 宋安齊, 馮鶴卿, 司亞元 申請(qǐng)人:江西省綠色工業(yè)集團(tuán)公司