專利名稱：竹桃霉素肟類，其制法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及竹桃霉素肟類，其制備方法及其在制備抗微生物制劑中的應(yīng)用。
竹桃霉素是一種14元大環(huán)內(nèi)脂抗菌素，具有與紅霉素類似的活性譜，在US2，757，123首次披露。光譜數(shù)據(jù)表明，竹桃霉素具有一個14元內(nèi)酯環(huán)，包括一個在9位的酮基，帶有兩個糖基，(C-5位的德糖胺和C-3位的齊墩果糖)和三個OH基(參見式Ⅱa)。
與其他的多氧大環(huán)內(nèi)酯不同，竹桃霉素在C-8原子上存在一個外向環(huán)氧環(huán)。迄今為止，已有許多關(guān)于上述官能基團(tuán)的化學(xué)變換。已知，在略微堿性條件下，C-11位的-OH基脫水、導(dǎo)致糖苷配基環(huán)中在C-10和C-11之間形成雙鍵，生成無水竹桃霉素(J.Am.Chem.Soc.，82，3225，1960)(參見式Ⅱb)。
從US4，069，379已知，通過與CrCl2在對反應(yīng)呈惰性溶劑中反應(yīng)，環(huán)氧基團(tuán)可轉(zhuǎn)化成亞甲基，生成式Ⅱc化合物。
已知，通過在C-8位的外向亞甲基的催化還原反應(yīng)，得到式Ⅱd和Ⅱe的8-甲基-竹桃霉素異頭物混合物(W.D.Celmer，Pure Appl.Chem.，28，413，1971)。
目前最適宜的制備肟類的技術(shù)和方法是使醛和酮與過量的羥胺鹽酸鹽在無機(jī)堿或有機(jī)堿如BaCO3，NaHCO3，三乙胺和吡啶存在下，在溶劑如醇或過量的有機(jī)堿中反應(yīng)(Methoden der Org.Chem.，4thEd.Vol.X/4，P.55)。
由于竹桃霉素分子的敏感性，傳統(tǒng)的肟化反應(yīng)不適于竹桃霉素。在酸性介質(zhì)中并在高溫下反應(yīng)，將導(dǎo)致環(huán)氧基的斷裂，除掉糖基，和反式內(nèi)酯化，而在堿性介質(zhì)中反應(yīng)導(dǎo)致脫水。另外，由于C-9酮基的立體阻礙，肟化反應(yīng)的條件比較苛刻，例如高溫，某些情況下高壓，強(qiáng)堿，和長的反應(yīng)時間(J.Org.Chem.，28，1557 1963)。
需要提供一種竹桃霉素肟類并且提供一種制備方法，滿足上述不利的要求，保證反應(yīng)在所需位置發(fā)生，不改變分子中須保留的部分。
本發(fā)明提供了一種式(Ⅰ)所示的竹桃霉素肟類
式中，R1代表氫或-CH3，R2代表-CH3或氫，或者R1和R2共同代表一個環(huán)氧基或＝CH2，R3代表-OH，而W線代表一個單鍵或雙鍵。
優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物是式Ⅰa-Ⅰe化合物
式(Ⅰ)所示的竹桃霉素肟類是新的化合物。
本發(fā)明還提供了一種制備式(Ⅰ)竹桃霉素肟類的方法，該方法包括使式(Ⅱ)竹桃霉素與過量的羥基胺鹽酸鹽反應(yīng)。
式中R1，R2，R3和W具有上述的含義，具體地講，上述式Ⅰa-Ⅰe化合物可以通過式Ⅱa-Ⅱe化合物與過量的羥基胺鹽酸鹽反應(yīng)來制備
所述的反應(yīng)可以與4-6摩爾過量的羥基胺鹽酸鹽，在過量的吡啶(作為溶劑)存在下，在氮?dú)饬髦?，在環(huán)境溫度下進(jìn)行2-40小時。
采用硅膠板60F254薄層色譜法(TLC)，以如下體系，確定反應(yīng)是否進(jìn)行完畢A)CHCl3/CH3OH/conc.NH4OH(6∶1∶0.1)B)CH2Cl2/CH3OH/conc.NH4OH(90∶9∶1.5)按如下方法分離反應(yīng)產(chǎn)物、用鹵代溶劑如氯仿或二氯甲烷，PH范圍為7.0-8.5，進(jìn)行萃取，最后蒸發(fā)有機(jī)溶劑至干。
從式Ⅱd和Ⅱe所示的8-甲基-竹桃霉素異頭物的混合物(事先不必分離直接進(jìn)行肟化反應(yīng))出發(fā)制備式Ⅰd和Ⅰe所示的8-甲基-竹桃霉素肟類。得到的粗產(chǎn)物中包括式Ⅰd和Ⅰe異頭物肟混合物，通過硅膠柱色譜法進(jìn)行分離，用CH2Cl2/CH3OH(85∶15)進(jìn)行洗脫。
通過在一系列標(biāo)準(zhǔn)的和臨床分離的菌株上測定體外抗菌活性。結(jié)果以最低抑制濃度(MIC;ug/ml)表示，并列于表1和2中。
以下實(shí)施例用以說明本發(fā)明。
實(shí)施例1 竹桃霉素肟Ⅰa向竹桃霉素磷酸鹽(Ⅱa)(13.4g，0.00186mol)在19ml無水吡啶的溶液中，加入NH2OH·HCl(6g，0.086mol)，反應(yīng)混合物在室溫下，于氮?dú)饬髦袛嚢?小時。將水(400ml)加入反應(yīng)混合物中，用二氯甲烷以PH5和7梯度萃取。有機(jī)萃取物在PH＝7.0下減壓蒸發(fā)至干，殘余物在高真空中于40℃干燥，得9.1g(70.0%)產(chǎn)物。
Rf(A)0.51(B)0.32M+702UV(MeOH)峰在290nm處消失
1H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm2.23[6H，s，(CH3)2N-]，3.33(3H，s，3″-OCH3)，10.82(＝NOH)，用D2O測時消失13C-NMR(CDCl3)δ，ppm175.8(C-1，丙酮)，159.6(-C＝N-)，104.3(C-1')，99.3(C-1″)，51.1(C-8-CH2)，40.3[C-3'-N(CH3)2]MIC(mcg/mL)(臨床分離物)肺炎鏈球菌 0.5;Strept.serol.group A 0.5實(shí)施例2 無水竹桃霉素肟(Ⅰb)將無水竹桃霉素肟(Ⅱb)(2.2g，0.0033mol)溶解于無水吡啶(4ml)，加入NH2OH·HCl(1.2g，0.017mol)，反應(yīng)混合物在室溫下于氮?dú)饬髦袛嚢?8小時。向該水懸浮液中加入氯仿，加入NaOH(20%于水中的溶液)調(diào)節(jié)pH值至8.3，用氯仿萃取(3×35ml)，萃取液經(jīng)干燥(K2CO3)和蒸發(fā)至干，得到2.1g(93.0%)白色固體。
Rf(A)0.52(B)0.37M+6841H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm2.21[6H，s，(CH3)2N-]，3.34(3H，s，3″-OCH3)，10.97(1H，s，＝NOH)，用D2O測時峰消失13C-NMR(CDCl3)δ，ppm174.8(C-1，丙酮)，157.3(-C＝N-)，104.6(C-1')，99.5(C-1″)，130.1(C-11)，135.0(C-10)，51.2(C-8-CH2)，40.3[C-3'-N(CH3)2]MIC(mcg/mL)(臨床分離物;)肺炎鏈球菌，2.0;Strept.serol.group A 1.0實(shí)施例3 8-亞甲基-竹桃霉素肟Ⅰc將8-亞甲基-竹桃霉素(Ⅱc)(2.7g，0.004mol)溶解于無水吡啶(19ml)中并加入羥基胺鹽酸鹽(1.35g，0.019mol)，反應(yīng)混合物在室溫下于氮?dú)饬髦袛嚢?小時。用二氯甲烷于pH＝5和7萃取后，將萃取液在pH＝7下蒸發(fā)至干，分離得到產(chǎn)物(2.0g，73.0%)。
Rf(A)0.58(B)0.35M+6861H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm2.29[6H，s，(CH3)2N-]，3.34(3H，s，3″-OCH3)，10.28(1H，s，＝NOH)，用D2O測時峰消失13C-NMR(CDCl3)δ，ppm176.6(C-1，丙酮)，163.4(-C＝N-)，141.4(C-8)，116.4(C-8a)，104.6(C-1')，99.2(C-1″)，40.4[C-3'-N(CH3)2]MIC(mcg/mL)(臨床分離物)肺炎鏈球菌 1.0;Strept.serol.group A 1.0實(shí)施例4 8-甲基-竹桃霉素肟Ⅰd和Ⅰe將8-甲基-竹桃霉素(異頭物Ⅱd和Ⅱe的混合物)(1.2g，0.0018mol)溶解于無水吡啶(4ml)中，并加入NH2OH·HCl(0.6g，0.0086mol)。反應(yīng)混合物在室溫下于氮?dú)饬髦袛嚢琛１由V分析表明，5小時后，化合物Ⅱd(Rf/A/＝0.67)完全轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物Ⅰd(Rf｜A｜＝0.48)，而起始化合物Ⅱe(Rf/A/＝0.63)生成產(chǎn)物Ⅰe(Rf/A/＝0.57)，產(chǎn)物為異構(gòu)體混合物(0.7g，57%)，可經(jīng)硅膠柱分離(CH2Cl/CH3OH85∶15)。
異構(gòu)體具有以下物理化學(xué)特性
ⅠdRf(A)0.48(B)0.34M+6881H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm2.42[6H，s，(CH3)2N-]，3.43(3H，s，3″-OCH3)，10.40(1H，s，＝NOH)，用D2O測時峰消失13C-NMR(CDCl3)δ，ppm176.8(C-1，丙酮)，165.5(-C＝N-)，104.7(C-1')，99.5(C-1″)，40.4[C-3'-N(CH3)2]ⅠeRf(A)0.57M+6881H-NMR(DMSO-d6)δ，ppm2.29[6H，s，(CH3)2N-]，3.32(3H，s，3″-OCH3)，10.61(1H，s，＝NOH)，用D2O測時峰消失13C-NMR(CDCl3)δ，ppm176.2(C-1，丙酮)，168.6(-C＝N-)，104.2(C-1')，98.5(C-1″)，40.4[C-3'-N(CH3)2]活性657u/mg藤黃八疊球菌ATCC934權(quán)利要求
1.式(I)所示的竹桃霉素肟類
式中R1代表氫或-CH3，R2代表-CH3或氫，或者R1和R2共同代表一個環(huán)氧基或=CH2，R3代表-OH，其中W線代表一個單鍵或雙鍵。
2.按照權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物，其特征在于，R1和R2共同代表一個環(huán)氧基，R3代表-OH基，W線代表一個鍵。
3.按照權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物，其特征在于，R1和R2共同代表一個環(huán)氧基，W線代表一個雙鍵。
4.按照權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物，其特征在于，R1和R2共同代表一個＝CH2基，R3代表-OH基，W線代表一個單鍵。
5.按照權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物，其特征在于，R1代表氫，R2代表-CH3基，R3代表-OH基，W線代表一個單鍵。
6.按照權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物，其特征在于，R1代表-CH3，R2代表氫，R3代表OH基，W線代表一個單鍵。
7.制備按照權(quán)利要求1所述的竹桃霉素肟類(Ⅰ)的方法，其特征在于，式(Ⅱ)所示竹桃霉素衍生物與4-6摩爾過量的羥基胺鹽酸化物在過量吡啶存在下，在氮?dú)饬髦?，在環(huán)境溫度下反應(yīng)2-40小時，然后分離產(chǎn)物。
式中R1，R2，R3和W線具有如上所述含義。
8.按照權(quán)利要求1所述的竹桃霉素肟類在制備抗微生物制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了竹桃霉素肟類，它們的制備方法，及其在制備抗微生物制劑中的應(yīng)用，式(I)中，R
文檔編號A61P31/04GK1054979SQ91101710
公開日1991年10月2日 申請日期1991年3月20日 優(yōu)先權(quán)日1990年3月21日
發(fā)明者戈?duì)栙Z納·萊扎瑞夫斯基, 思魯?shù)ぁぜs基克 申請人:普利瓦藥物、化學(xué)、食品和化妝品工業(yè)公司