專利名稱：一種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般的涉及聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，特別的涉及巰基聚乙二醇修飾劑修飾干擾素后所得的聚乙二醇化干擾素的穩(wěn)定的水溶液。
背景技術(shù)：
水溶液型劑型是蛋白質(zhì)類藥物最常見的劑型，例如注射液、滴眼劑、噴霧劑等。但由于蛋白質(zhì)在水溶液中很不穩(wěn)定，容易被化學(xué)或生物降解或改變構(gòu)型構(gòu)象，從而造成生物活性降低或喪失，因此，蛋白質(zhì)的水溶液劑型為了貯存與運輸?shù)姆奖憬?jīng)常需要進行凍干處理，在使用時再用生理鹽水溶解成水溶液狀態(tài)。但凍干后的蛋白質(zhì)水溶液在使用時再溶解一方面會延長患者用藥時間，另一方面會帶來因溶解不完全、溶劑生理鹽水用量不準(zhǔn)、吸取注射溶解液不準(zhǔn)等帶來的給藥劑量準(zhǔn)確性與安全性問題。因此，在臨床上更愿意直接使用水溶液狀態(tài)的蛋白質(zhì)類藥物的水溶液型劑型，而不愿意使用凍干粉末狀態(tài)的蛋白質(zhì)類藥物的水溶液型劑型。聚乙二醇長效技術(shù)的出現(xiàn)使聚乙二醇化蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性較未化學(xué)修飾蛋白質(zhì)有了很大的提高，在一定程度上使將蛋白質(zhì)類藥物制備成水溶液狀態(tài)的水溶液型劑型更加容易。但聚乙二醇長效技術(shù)并不能從根本上解決蛋白質(zhì)在水溶液中不穩(wěn)定的問題，因此還需要優(yōu)化配方以制備真正穩(wěn)定的可以水溶液狀態(tài)貯存與運輸?shù)牡鞍踪|(zhì)類藥物的水溶液型劑型。為了使蛋白質(zhì)在水溶液中穩(wěn)定，一方面水溶液需要有適宜的pH，另一方面水溶液中還需要添加蛋白質(zhì)活性保護劑、促溶劑、防腐劑等物質(zhì)，其中蛋白質(zhì)活性保護劑與促溶劑一般是必需的。常用的蛋白質(zhì)活性保護劑包括但不局限于各種氨基酸、白蛋白和多元醇類物質(zhì)，例如精氨酸、賴氨酸、白蛋白、甘露醇、海藻糖、右旋糖酐，但最常使用的是白蛋白，因為它對蛋白質(zhì)的活性保護作用一般最好，且往往還對蛋白質(zhì)有其他多種保護作用。常用的促溶劑是吐溫等表面活性劑類物質(zhì)，其中最常使用的是吐溫-80。但鑒于白蛋白在近年來價格越來越高，臨床供需矛盾突出，而提取自人體血液的白蛋白潛在的污染病毒類物質(zhì)的可能又會增加注射添加有白蛋白的藥物的安全性風(fēng)險，且白蛋白還會影響蛋白質(zhì)藥物成品的多種檢測，因此在蛋白質(zhì)藥物制劑中不用或少用白蛋白已經(jīng)成為了近年來蛋白質(zhì)藥物劑型領(lǐng)域研究與應(yīng)用的重點與難點問題。此外，吐溫類表面活性劑物質(zhì)的潛在安全性風(fēng)險還沒有得到完全評估，進口的吐溫類物質(zhì)按生產(chǎn)廠家說明往往不能用于臨床醫(yī)用配制品中，而國產(chǎn)的吐溫類物質(zhì)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)又往往達(dá)不到醫(yī)用級別， 因此，在蛋白質(zhì)藥物劑型中還應(yīng)該慎用吐溫等表面活性劑類物質(zhì)作為促溶劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，該水溶液中含有比常規(guī)用量少的吐溫-80，不含有白蛋白，以解決以水溶液狀態(tài)存在的蛋白質(zhì)類藥物水溶液型劑型不易制備、貯存與運輸，制備時需要添加高濃度吐溫等表面活性劑類物質(zhì)與白蛋白的技術(shù)問題。為實現(xiàn)此目的，在基礎(chǔ)的實施方案中，本發(fā)明提供一種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，其不含白蛋白但含有1)治療有效量的聚乙二醇化干擾素；2)2-200mmol/L的醋酸-醋酸鈉，PH5. 5-6.0緩沖溶液；3)萬分之一至萬分之五濃度(v/v)的吐溫-80;
4)0. 4-0. 8% (m/v)的 NaCl。在一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，其不含白蛋白但含有I) IO-IOOOiI g/ml的聚乙二醇化干擾素；2)2-200mmol/L的醋酸-醋酸鈉，pH5. 5-6. 0緩沖溶液；3)萬分之一至萬分之五濃度(v/v)的吐溫-80 ；4)0. 4-0. 8% (m/ V)的 NaCl。在一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，其不含白蛋白但含有I) IO-IOOOiI g/ml的聚乙二醇化干擾素；2)2-200mmol/L的醋酸-醋酸鈉，pH5. 5-6. 0緩沖溶液；3)萬分之三至萬分之五濃度(v/v)的吐溫-80 ；4)0. 4-0. 8% (m/ V)的 NaCl。在一種優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液中所述的聚乙二醇化干擾素為巰基聚乙二醇修飾劑與有游離巰基的干擾素連接得到。在一種更加優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液中所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. I所示氨基酸序列的干擾素連接得到。在一種更加優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液中所述的聚乙二醇化干擾素由分子量40KDa的雙鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. I所示氨基酸序列的干擾素連接得到。在一種更加優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液中所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的干擾素連接得到。在一種更加優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液中所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. 3所示氨基酸序列的干擾素連接得到。在一種更加優(yōu)選的實施方案，本發(fā)明的聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液中所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與干擾素a Ib連接得到。本發(fā)明中使用的術(shù)語“聚乙二醇修飾劑”，也即“PEG修飾劑”是指單甲氧基聚乙二醇修飾劑，也即用甲氧基封閉聚乙二醇分子一端的一個羥基，而用適宜的活化方法活化另一端的一個羥基后所得的具有活化端的聚乙二醇。由于羥基自身的反應(yīng)活性很低，所以經(jīng)過活化后的聚乙二醇分子的反應(yīng)活性有了很大的提高，才可被稱為“聚乙二醇修飾劑”。本發(fā)明所述的“巰基聚乙二醇修飾劑”是專一性的修飾蛋白質(zhì)分子中未參與形成二硫鍵的游離巰基的聚乙二醇修飾劑，可通過商業(yè)渠道得到或通過已知的活化機理活化制備。本發(fā)明所述的“單鏈巰基聚乙二醇修飾劑”是一個活化端連接一個聚乙二醇分子的聚乙二醇修飾劑，“雙鏈巰基聚乙二醇修飾劑”是一個活化端通過一個連接分子(例如賴氨酸)連接兩個聚乙二醇分子的聚乙二醇修飾劑。
具體實施例方式通過如下的實施例對本發(fā)明的實施作進一步說明，但本發(fā)明的實施方式并不局限于如下的實施例。實施例I :不同配方聚乙二醇化干擾素水溶液的制備按照如下表I的配制方法配制不同配方聚乙二醇化干擾素的水溶液，其中 “聚乙二醇化干擾素I”由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑mPEG-MAL與SEQ ID No. I所示氨基酸序列的干擾素連接得到，在中國專利申請200780034504. 3 (對應(yīng)PCT申請PCT/CN2007/003711)中公開了其制備方法等信息(對應(yīng)于該專利申請中的mPEG (20KD) -MIFNcys86); “聚乙二醇化干擾素2 ”由分子量40KDa的雙鏈巰基聚乙二醇修飾劑mPEG2-MAL與SEQ ID No. I所示氨基酸序列的干擾素連接得到，同樣在中國專利申請200780034504. 3中公開了其制備方法等信息(對應(yīng)于該專利申請中的mPEG (40KD) -MIFNcys86); “聚乙二醇化干擾素3 ”由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑mPEG-MAL與SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的干擾素連接得到，同樣在中國專利申請200780034504. 3中公開了其制備方法等信息(對應(yīng)于該專利申請中的mPEG (20KD) -IFN a -2aCys85);“聚乙二醇化干擾素4”由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑mPEG-MAL與SEQ ID No. 3所示氨基酸序列的干擾素連接得到，在中國專利申請201010149849. 7中公開了其制備方法等信息(對應(yīng)于該專利申請中的 mPEG(20KD)-MIFNcys72); “聚乙二醇化干擾素5”由分子量20KDa的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑 mPEG-MAL與干擾素a Ib連接得到，在中國專利申請2005100766676. X中公開了其制備方法等信息(對應(yīng)于該專利申請中的mPEG (20KD)-IFN a -lb)。表I不同配方聚乙二醇化干擾素水溶液的配制方法
權(quán)利要求
1.一種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，其特征是不含白蛋白但含有1)治療有效量的聚乙二醇化干擾素；2)2-200mmol/L的醋酸-醋酸鈉，pH5. 5-6. 0緩沖溶液；3)萬分之一至萬分之五濃度(v/v)的吐溫-80 ;4)0. 4-0. 8% (m/v)的NaCl。
2.—種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，其特征是不含白蛋白但含有I)10-1000 u g/ml的聚乙二醇化干擾素；2)2-200mmol/L的醋酸-醋酸鈉，pH5. 5-6. 0緩沖溶液；3)萬分之一至萬分之五濃度(v/v)的吐溫-80 ；4)0. 4-0. 8% (m/v)的NaCl。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的水溶液，其特征是不含白蛋白但含有I)IO-IOOOii g/ml的聚乙二醇化干擾素；2)2-200mmol/L的醋酸-醋酸鈉，pH5. 5-6. 0緩沖溶液；3)萬分之三至萬分之五濃度(v/v)的吐溫-80 ;4)0. 4-0. 8% (m/v)的 NaCl。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3之一所述的水溶液，其特征是所述的聚乙二醇化干擾素由巰基聚乙二醇修飾劑與有游離巰基的干擾素連接得到。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶液，其特征是所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa 的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. I所示氨基酸序列的干擾素連接得到。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶液，其特征是所述的聚乙二醇化干擾素由分子量40KDa 的雙鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. I所示氨基酸序列的干擾素連接得到。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶液，其特征是所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa 的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. 2所示氨基酸序列的干擾素連接得到。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶液，其特征是所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa 的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與SEQ ID No. 3所示氨基酸序列的干擾素連接得到。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶液，其特征是所述的聚乙二醇化干擾素由分子量20KDa 的單鏈巰基聚乙二醇修飾劑與干擾素a Ib連接得到。
全文摘要
本發(fā)明屬于蛋白質(zhì)類藥物的制劑領(lǐng)域，涉及一種聚乙二醇化干擾素穩(wěn)定的水溶液，其特征是不含白蛋白但含有1)治療有效量的聚乙二醇化干擾素；2)2-200mmol/L的醋酸-醋酸鈉，pH5.5-6.0緩沖溶液；3)萬分之一至萬分之五濃度(v/v)的吐溫-80；4)0.4-0.8％(m/v)的NaCl。該聚乙二醇化干擾素水溶液中雖然含有低濃度的吐溫等表面活性劑類物質(zhì)，不含有白蛋白，但基本能夠與含有高濃度吐溫等表面活性劑類物質(zhì)與高濃度白蛋白的水溶液相比具有相同的穩(wěn)定性。
文檔編號A61K38/21GK102526758SQ20121004368
公開日2012年7月4日 申請日期2012年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月23日
發(fā)明者劉金毅, 周敏毅, 程永慶 申請人:北京三元基因工程有限公司