專利名稱：地不容總生物堿提取純化工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物堿提取技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種地不容總生物堿提取純化工藝。
背景技術(shù)：
地不容為防己科植物地不容(SepHaniadelavayi Diels)的塊根。主要分布于云南及四川等地。具有清熱解毒、消痰、截瘧、止痛的功用，主要治療癰疽瘡腫、喉閉、瘧疾、胃痛等癥。生物堿(alkaloid)是指中藥中一類含氮雜環(huán)的有機(jī)物，具有堿性和顯著的生理 活性。目前從植物中分離出的生物堿有五六千種，一些生物堿因其抗癌抗腫瘤及低毒性、低成本成為近年來研究的熱點(diǎn)?？茖W(xué)高效地從中藥植物中提取、純化其中的生物堿成分是提高中藥質(zhì)量的核心問題，因此生物堿提取與純化技術(shù)成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。據(jù)現(xiàn)代研究報(bào)道，地不容總生物堿具有消腫止痛，抗腫瘤的作用，因此對(duì)其制備工藝研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義?，F(xiàn)有提取工藝中并沒有針對(duì)地不容中總生物堿的提取方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種地不容總生物堿提取純化工藝。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)地不容總生物堿提取純化工藝，它包括提取、分離和純化三個(gè)步驟，其中所述的提取包括以下子步驟al、稱取地不容藥材粗粉，先用重量為地不容藥材0. 5 I倍量的0. I 2%的稀酸溶液進(jìn)行溶脹，溶脹時(shí)間為I 3h ;a2、溶脹完畢后，將藥材逐層放入滲漉筒中，緩慢加入重量為地不容藥材3 5倍量的0. I 2%的稀酸溶液浸潰10 15h ；a3、浸潰完畢后開始滲漉，滲漉速度為3 7ml/min，當(dāng)滲漉至滲漉液與碘化鉍鉀試劑反應(yīng)無沉淀產(chǎn)生時(shí)，停止?jié)B漉；a4、用濃氨水調(diào)滲漉液pH值至9 10，產(chǎn)生大量沉淀，抽濾，得沉淀于真空干燥器中在30 50°C下干燥至恒重，得到地不容總生物堿；所述的分離包括以下子步驟bl、將大孔樹脂用適量無水乙醇浸泡20 30h，傾倒掉上層乙醇，然后濕法裝柱，并不時(shí)用玻璃棒攪拌以除去氣泡，再用樹脂體積的兩至三倍的乙醇與蒸餾水反復(fù)洗脫，以除去樹脂中的殘留物，至乙醇與蒸餾水混合不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水以同樣流速洗至流出液無醇味；b2、稱取提取得到的地不容總生物堿，再用重量為地不容總生物堿200/3倍量的
0.5%的稀酸溶液溶解，然后用濃氨水調(diào)pH = 5，過濾除去不溶物向?yàn)V液中加入蒸餾水，得到異粉防己堿濃度為0. 400mg/ml 0. 433mg/ml的地不容樣品液；b3、將地不容樣品液按照I 5ml/min的吸附流速通過已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附；所述的純化操作方法為吸附好后依次用體積為地不容樣品液25/8倍量的蒸餾水和體積為地不容樣品液45/8倍量的百分含量為75%的乙醇溶液以I 5ml/min的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。所述的大孔吸附樹酯為D101、AB-8、S-8、D140、D141、HPD 系列、D1300、X_5、Sp825、D312、D20UNKA9大孔吸附樹酯中的任意一種。所述的稀酸為稀鹽酸或稀硫酸。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明一次可提取地不容中所有生物堿，并且提取率高，有利于寶貴的天然資源的綜合利用；本發(fā)明所選用的大孔吸附樹脂對(duì)生物堿的吸附能力強(qiáng)，洗脫容易、方便，洗脫率高，純度高；本發(fā)明工藝步驟少，操作簡單，方便應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)。
下面通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明的效果I實(shí)驗(yàn)儀器與材料I. I實(shí)驗(yàn)藥材地不容，為防己科植物地不容(SepHnama delavayi Diels)的塊根。I. 2主要儀器及試劑儀器安捷倫1100高效液相色譜儀，卡瑪格全自動(dòng)雙波長薄層掃描儀，Gilson分析制各多動(dòng)能高效液相色譜儀，日本島津IR-420紅外分光光度計(jì)，美國貝克曼CS-700全自動(dòng)生化測定儀，日本島津RF-510映光光度計(jì)，瑞士 PAG-160電子天平，DZF-6021型真空干燥器，燒杯，量筒，膠頭滴管等。材料及試劑地不容藥材，無水乙醇，95%乙醇，氨水，濃鹽酸，濃硫酸，以上試劑均為AR級(jí)。色譜甲醇，色譜乙腈，蒸餾水。2實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果2. I地不容總生物堿的提取工藝研究2. I. I異粉防己堿含量測定方法異粉防己堿對(duì)照品液的制備精密稱取在真空干燥器中干燥至恒重的異粉防己堿對(duì)照品2mg,置于IOml容量瓶中，加無水乙醇定容至刻度，超聲IOmin充無水乙醇至刻度,搖勻，即得濃度為0. 2mg/ml的異粉防己堿對(duì)照品溶液。2. I. 2標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定精密吸取對(duì)照品溶液2111，4111，6111，8111，10111，12111進(jìn)樣，記錄色譜圖，測定峰面積，結(jié)果見表I。以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸，得回歸方程。色譜柱DikmaDiamOnsil cl8250 X 4. 6mm, 5um柱溫30°C流動(dòng)相乙腈磷酸鹽緩沖液=6 4流速1.Oml/min測定波長210nm理論塔板數(shù)不得低于1500表I異粉防己堿對(duì)照品測定結(jié)果
權(quán)利要求
1.地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于它包括提取、分離和純化三個(gè)步驟，其中所述的提取包括以下子步驟 al、稱取地不容藥材粗粉，先用重量為地不容藥材O. 5 I倍量的O. I 2%的稀酸溶液進(jìn)行溶脹，溶脹時(shí)間為I 3h ; a2、溶脹完畢后，將藥材逐層放入滲漉筒中，緩慢加入重量為地不容藥材3 5倍量的.O.1 2%的稀酸溶液浸潰10 15h ； a3、浸潰完畢后開始滲漉，滲漉速度為3 7ml/min，當(dāng)滲漉至滲漉液與碘化鉍鉀試劑反應(yīng)無沉淀產(chǎn)生時(shí)，停止?jié)B漉； a4、用濃氨水調(diào)滲漉液pH值至9 10，產(chǎn)生大量沉淀，抽濾，得沉淀于真空干燥器中在.30 50°C下干燥至恒重，得到地不容總生物堿； 所述的分離包括以下子步驟 bl、將大孔樹脂用適量無水こ醇浸泡20 30h，傾倒掉上層こ醇，然后濕法裝柱，并不時(shí)用玻璃棒攪拌以除去氣泡，再用樹脂體積的兩至三倍的こ醇與蒸餾水反復(fù)洗脫，以除去樹脂中的殘留物，至こ醇與蒸餾水混合不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水以同樣流速洗至流出液無醇味； b2、稱取提取得到的地不容總生物堿，再用重量為地不容總生物堿50 70倍量的.O.1 2%的稀酸溶液溶解，然后用濃氨水調(diào)pH=5，過濾除去不溶物向?yàn)V液中加入蒸餾水，得到異粉防己堿濃度為O. 400mg/ml O. 433mg/ml的地不容樣品液； b3、將地不容樣品液按照I 5ml/min的吸附流速通過已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附； 所述的純化操作方法為吸附好后依次用體積為地不容樣品液2 4倍量的蒸餾水和體積為地不容樣品液5 7倍量的百分含量為75%的こ醇溶液以I 5ml/min的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于它包括提取、分離和純化三個(gè)步驟，其中所述的提取包括以下子步驟 al、稱取地不容藥材粗粉，先用重量為地不容藥材O. 5倍量的O. 5%的稀酸溶液進(jìn)行溶脹，溶脹時(shí)間為2h; a2、溶脹完畢后，將藥材逐層放入滲漉筒中，緩慢加入重量為地不容藥材4倍量的O. 5%的稀酸溶液浸潰12h ； a3、浸潰完畢后開始滲漉，滲漉速度為5ml/min，當(dāng)滲漉至滲漉液與碘化鉍鉀試劑反應(yīng)無沉淀產(chǎn)生時(shí)，停止?jié)B漉； a4、用濃氨水調(diào)滲漉液pH值至9 10，產(chǎn)生大量沉淀，抽濾，得沉淀于真空干燥器中在.40°C下干燥至恒重，得到地不容總生物堿； 所述的分離包括以下子步驟 bl、將大孔樹脂用適量無水こ醇浸泡24h，傾倒掉上層こ醇，然后濕法裝柱，并不時(shí)用玻璃棒攪拌以除去氣泡，再用樹脂體積的兩至三倍的こ醇與蒸餾水反復(fù)洗脫，以除去樹脂中的殘留物，至こ醇與蒸餾水混合不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水以同樣流速洗至流出液無醇味； b2、稱取提取得到的地不容總生物堿，再用重量為地不容總生物200/3倍量的O. 5%的稀酸溶液溶解，然后用濃氨水調(diào)pH=5，過濾除去不溶物向?yàn)V液中加入蒸餾水，得到異粉防己堿濃度為O. 433mg/ml的地不容樣品液； b3、將地不容樣品液按照3ml/min的吸附流速通過已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附； 所述的純化操作方法為吸附好后依次用體積為地不容樣品液25/8倍量的蒸餾水和體積為地不容樣品液45/8倍量的百分含量為75%的こ醇溶液以3ml/min的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于所述的大孔吸附樹酯為 D101、AB-8、S-8、D140、D141、HPD 系列、D1300、X_5、Sp825、D312、D201、NKA9大孔吸附樹酯中的任意ー種。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于所述的稀酸為稀鹽酸或稀硫酸。
全文摘要
本發(fā)明公開了地不容總生物堿提取純化工藝，它包括以下步驟提取，將地不容藥材粗粉用稀酸滲漉，用濃氨水調(diào)滲漉液pH值，得沉淀于真空干燥器中干燥至恒重，得到地不容總生物堿；分離，將地不容總生物堿制成地不容樣品液通過已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行吸附；純化，吸附好后依次用蒸餾水和75%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。本發(fā)明的有益效果是一次可提取地不容中所有生物堿，并且提取率高，有利于寶貴的天然資源的綜合利用；選用的大孔吸附樹脂對(duì)生物堿的吸附能力強(qiáng)，洗脫容易、方便，洗脫率高，純度高；工藝步驟少，操作簡單，方便應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102631414SQ20121012457
公開日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月25日
發(fā)明者彭騰 申請(qǐng)人:成都煜泉綠健科技有限公司