專利名稱：一種鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑。
背景技術(shù)：
鱘魚是一種經(jīng)濟(jì)魚類，目前國外鱘漁業(yè)是世界上利潤最高的產(chǎn)業(yè)之一。我國境內(nèi)的鱘魚主要分布于長江、黑龍江及其支流，目前共有2科4屬11種。但由于人口增長，需求增加導(dǎo)致的捕撈過度，加上江河污染已使黑龍江的鱘魚資源量大減少。1998年4月1日起，聯(lián)合國華盛頓公約(CITIS)將全世界野生鱘魚認(rèn)定為瀕臨絕種的保護(hù)動(dòng)物。野生的史氏鱘被列為我國二級(jí)保護(hù)動(dòng)物。為了增加資源量，在保護(hù)的同時(shí)，我們國家也采用了增殖放流以及人工養(yǎng)殖的措施。鱘魚生長速度快，廣溫、廣鹽，對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性強(qiáng)，具有很好的養(yǎng)殖特性。早在1957我國即成功地進(jìn)行了史氏鱘的人工繁殖，并獲得少量魚苗。80年代末90 年代初，有關(guān)單位還開展了池塘養(yǎng)殖、餌料生物學(xué)、以及鱘鰉雜交等方面的研究。近年來史氏鱘的人工養(yǎng)殖發(fā)展迅速，已成為較為常見的商品魚，隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，其病害也逐漸增加，經(jīng)常會(huì)發(fā)生某些疾病，包括病毒、細(xì)菌和寄生蟲感染等疾病，其中有常見病，也有不明原因的暴發(fā)性疾??；尤其在鱘科魚類的魚種階段，病害頻繁發(fā)生，魚種免疫力低下，出現(xiàn)生長狀況不良等問題。但由于鱘魚開始規(guī)?；B(yǎng)殖的時(shí)間短，相關(guān)的基礎(chǔ)研究包括病害研究相對(duì)薄弱，因此疾病的診斷和治療都較為困難，如何有效預(yù)防就成了關(guān)鍵。 提高機(jī)體的非特異性免疫能力，可以有效抵抗疾病入侵，減少發(fā)病和死亡率，許多中草藥就具有這樣的功效。研究表明，中草藥具有調(diào)節(jié)機(jī)體健康、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用，作為一種天然的藥物越來越受到人們的重視。中草藥的品種眾多，藥性多樣，價(jià)格低廉，資源豐富，采用中草藥作為免疫添加劑不但有助于提高機(jī)體免疫力，而且由于它屬于天然物質(zhì)，污染少， 所以、更符合綠色漁業(yè)的要求，有利于人們對(duì)食品安全的要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是為了解決現(xiàn)有鱘科魚類魚種階段病害頻繁發(fā)生、免疫力低下及生長狀況不良的問題，而提供一種鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑。鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由16 Mg的甘草、12 18g的金銀花、12 18g 的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑葉混合制成。本發(fā)明中甘草具有增強(qiáng)免疫力、保肝、抗病毒、抗菌、抗?jié)兒徒舛镜墓π?，甘草及其有效成分在國?nèi)外均有研究，常單獨(dú)或配方使用，預(yù)防和治療疾病；金銀花則清熱解毒， 也可抗菌抗病毒，增強(qiáng)免疫力，并且有對(duì)抗細(xì)菌內(nèi)毒素保護(hù)機(jī)體的作用；紫草具有抗菌抗病毒、消炎、保肝的作用；葛根則能調(diào)節(jié)循環(huán)系統(tǒng)、改善肝臟功能并清熱解毒；桑葉也可清熱解毒、抗菌消炎，并且提高免疫力。本發(fā)明根據(jù)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)及應(yīng)用推廣單位的試驗(yàn)證明它具有如下特點(diǎn)(1)能有效增強(qiáng)魚體的免疫力、抗氧化能力，從而提高對(duì)疾病的抵抗力，降低發(fā)病率；
(2)能顯著提高魚的增重率，生長狀況良好，縮短養(yǎng)成時(shí)間，提高養(yǎng)殖產(chǎn)量；(3)在熱應(yīng)激條件下，可以調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)外界的抵抗力；(4)長期添加投喂后魚體沒有出現(xiàn)毒副作用和不良反應(yīng)；(5)彌補(bǔ)了鱘魚魚種生產(chǎn)中缺乏此類免疫添加劑的空白；因而，鱘方具有提高鱘魚魚種免疫抗病能力和促進(jìn)魚類健康生長的雙重效果，對(duì)減少我國鱘魚養(yǎng)殖過程中爆發(fā)性疾病頻繁發(fā)生的幾率有一定促進(jìn)作用。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由16 Mg的甘草、 12 18g的金銀花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑葉混合制成。本實(shí)施方式中鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑的制備一、稱取16 Mg的甘草、 12 18g的金銀花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑葉，粉碎后放入砂鍋中，加水浸泡30min，第一次熬45min，將藥汁倒出，再加水熬30min，過濾，將兩次藥汁合并濃縮成ImL藥液相當(dāng)于Ig鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑(干物質(zhì))的濃度的水煎劑，備用。本實(shí)施方式中鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑的制備稱取16 24g的甘草、12 18g的金銀花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑葉，混合后進(jìn)行粉碎，粉碎目數(shù)為120目 160目，備用。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由17 23g的甘草、13 17g的金銀花、13 17g的紫草、9 Ilg的葛根和9 Ilg的桑葉混合制成。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由18g的甘草、14g的金銀花、14g的紫草、IOg的葛根和IOg的桑葉混合制成。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由20g的甘草、15g的金銀花、15g的紫草、Ilg的葛根和Ilg的桑葉混合制成。其它與具體實(shí)施方式
一相同。試驗(yàn)在試驗(yàn)站水族箱中進(jìn)行了口灌和混飼試驗(yàn)，并于口灌試驗(yàn)中設(shè)立了常溫和高溫刺激組，用以研究藥物在熱應(yīng)激情況下(主要針對(duì)運(yùn)輸?shù)忍厥馇闆r造成的高溫刺激) 對(duì)魚機(jī)體的作用效果。后又在中國水產(chǎn)科學(xué)研究院鱘魚繁育工程技術(shù)中心進(jìn)行了應(yīng)用推廣試驗(yàn)。1. 口灌試驗(yàn)鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑的制備一、稱取18g的甘草、15g的金銀花、15g的紫草、IOg的葛根和12g的桑葉，粉碎后放入砂鍋中，加水浸泡30min，第一次熬45min，將藥汁倒出，再加水熬30min，過濾，將兩次藥汁合并濃縮成70mL，其中ImL藥液相當(dāng)于Ig鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑(干物質(zhì))的水煎劑，備用。將藥液按給藥劑量稀釋，以達(dá)到每IOOg魚體重口灌0. 3mL的藥液濃度，按 70g/50kg的劑量經(jīng)口灌服鱘方藥液，對(duì)照組按照體重等比例灌服蒸餾水。
選取健康非免疫狀態(tài)下的1齡鱘魚，于室內(nèi)水族箱(0.90mX0. 50mX0.45m)，在 22°C下預(yù)飼2周，保持各水族箱養(yǎng)殖條件均一，每天按魚體質(zhì)量的2. 0%投喂全價(jià)基礎(chǔ)飼料。2周后對(duì)試驗(yàn)組魚連續(xù)口灌給藥7天，分別于試驗(yàn)第1和第7天給藥前準(zhǔn)確稱量每尾魚空腹體質(zhì)量，記錄數(shù)據(jù)。第8天，將試驗(yàn)組和對(duì)照組半數(shù)魚放入30°C的控溫水族箱中熱刺激 2h，然后與在正常水溫22°C下的試驗(yàn)魚一同取樣，用3g/L肝素鈉潤洗過的注射器自試驗(yàn)魚尾動(dòng)(靜)脈采血，4°C下3500r/min離心20min，取上清血漿及底部紅細(xì)胞，中間層白細(xì)胞備用；解剖取魚鰓、肝、幽門毛囊、胃、腸等各組織樣品，立即于-80°C下保存，待測(cè)。2.混飼試驗(yàn)鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑的制備稱取20g的甘草、15g的金銀花、15g的紫草、IOg的葛根和IOg的桑葉，混合后進(jìn)行粉碎，粉碎目數(shù)為140目，備用；然后以4. 5%的比例加入到基礎(chǔ)飼料當(dāng)中混勻，制成藥餌。隨機(jī)選取健康費(fèi)免疫狀態(tài)下1齡施氏鱘于室內(nèi)水族箱(0. 90mX0. 50mX0. 45m)水溫22°C下預(yù)飼兩周，每組兩個(gè)重復(fù)各15尾魚，保持各水族箱養(yǎng)殖條件均一，每天按魚體重的2. 0 %投喂全價(jià)基礎(chǔ)飼料。預(yù)飼結(jié)束后，每天按照魚體重2. 5 %投喂藥餌，連續(xù)給藥30天， 停食一天后，自實(shí)驗(yàn)魚尾動(dòng)(靜)脈采血，并解剖取魚肝組織樣品，立即于-80°C下保存，待測(cè)。3.養(yǎng)殖試驗(yàn)鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑的制備方法與口灌試驗(yàn)相同。按干藥量含量為 5. 6 %的比例加入到基礎(chǔ)飼料當(dāng)中混勻，制成藥餌。 養(yǎng)殖終試采用混飼方法，取健康、非免疫狀態(tài)下的鱘魚，于室外圓形水泥池(直徑 2.5m)中，循環(huán)水養(yǎng)殖，試驗(yàn)期間水溫15-19°C。試驗(yàn)設(shè)試驗(yàn)組及對(duì)照組，分別投喂加藥飼料及基礎(chǔ)飼料，每組300尾，設(shè)平行，每天按照體重的2.0%投喂。試驗(yàn)周期為30天。結(jié)束后，每組隨機(jī)選取15尾試驗(yàn)魚，于尾動(dòng)/靜脈處采集肝素抗凝血，4°C下以3500r/min離心 20min,取血漿。解剖，取肝臟等組織的樣品，將血清及組織樣品立即置于-70°C下保存?zhèn)溆谩?.攻毒試驗(yàn)選取健康非免疫狀態(tài)下的1齡鱘魚(60_80g之間)，于室內(nèi)水族箱 (0. 90mX0. 50mX0. 45m)，在22°C下預(yù)飼2周，每箱15尾，保持各水族箱養(yǎng)殖條件均一，每天按魚體質(zhì)量的2. 0%投喂全價(jià)基礎(chǔ)飼料。采用黑龍江水產(chǎn)研究所鑒定保存的克里斯坦森耶爾森氏菌(Yersinia kristensenii)進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，先選取60尾鱘魚，按照累積法亦稱 Reed-Mueuch氏法計(jì)算，半致死濃度LD50 = 3. 6*107。試驗(yàn)組及對(duì)照組均按口灌試驗(yàn)的方法灌服鱘方水煎劑和蒸餾水，每組15尾，均設(shè)平行，一周后按半致死濃度進(jìn)行攻毒。相關(guān)指標(biāo)測(cè)定1. 口灌試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)測(cè)定混飼鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑(簡稱鱘方)的施氏鱘增長及各種生理生化，免疫相關(guān)指標(biāo)如下1. 1鱘方對(duì)施氏鱘生長的影響表1-1灌服鱘方后不同時(shí)間下施氏鱘的增重情況
權(quán)利要求
1.一種鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑，其特征在于鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由 16 Mg的甘草、12 18g的金銀花、12 18g的紫草、8 12g的葛根和8 12g的桑葉混合制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑，其特征在于鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由17 23g的甘草、13 17g的金銀花、13 17g的紫草、9 Ilg的葛根和9 Ilg的桑葉混合制成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑，其特征在于鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由18g的甘草、14g的金銀花、14g的紫草、IOg的葛根和IOg的桑葉混合制成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑，其特征在于鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由20g的甘草、15g的金銀花、15g的紫草、Ilg的葛根和Ilg的桑葉混合制成。
全文摘要
一種鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑，它涉及一種魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑。它解決了現(xiàn)有鱘科魚類魚種階段病害頻繁發(fā)生、免疫力低下及生長狀況不良的問題。鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑由甘草、金銀花、紫草、葛根和桑葉混合制成。本發(fā)明鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑，能有效增強(qiáng)魚體的免疫力、抗氧化能力，從而提高對(duì)疾病的抵抗力，降低發(fā)病率；能顯著提高魚的增重率，生長狀況良好，縮短養(yǎng)成時(shí)間，提高養(yǎng)殖產(chǎn)量；在熱應(yīng)激條件下，可以調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)外界的抵抗力；長期添加投喂后魚體沒有出現(xiàn)毒副作用和不良反應(yīng)；彌補(bǔ)了鱘魚魚種生產(chǎn)中缺乏此類免疫添加劑的空白；因而，鱘魚魚種用中草藥免疫增強(qiáng)劑具有提高鱘魚免疫抗病能力和促進(jìn)魚類健康生長的雙重效果。
文檔編號(hào)A61P39/06GK102552411SQ20121006861
公開日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2012年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月15日
發(fā)明者劉紅柏, 盧彤巖, 徐黎明, 李紹戊, 王荻 申請(qǐng)人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所